細胞外泌體的組成都包括什么？

細胞外泌體是細胞分泌的大小約為30-150nm的納米物質，是細胞外囊泡的一類，結構類似于細胞，磷脂雙分子層表面具有多種特異性膜蛋白，內部搭載著多種蛋白質、RNA、DNA等重要生物信號物質，廣泛分布于血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、膽汁等各種體液中。外泌體的來源細胞種類非常豐富，幾乎在人體血液、尿液、母乳和唾液等多種體液中都能發現它的蹤跡?？蓚鬟f包括DNA、RNA、miRNA、脂質和蛋白質在內的多種生物活性物質，同時保護包裹的內含物免受核酸酶和蛋白酶，以及外界壞境變化引起的降解...

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細胞增殖分析（CCK-8 法）

CellCountingKit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。CCK-8&MTT方法比較方法優點缺點CCK-8法靈敏度高、不使用有機溶劑、檢測迅速、重復性好價格較MTT貴、CCK8試劑的顏色為淡紅色、與含酚紅的培養基顏色接近，容易漏加或多加MTT法價格便宜操作步驟較多，需要使用有機試劑，靈敏度不如CCK-8，多數需要配制，檢測時間長，細胞毒性較高一、原理：CCK-8是MTT的升級產品，其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學名：2-(2-甲氧...

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從肝臟組織中制備細胞核

一、材料與儀器：大鼠、裂解緩沖液、濃蔗糖溶液、超速離心機、組織研磨器二、實驗步驟：1.配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液（PMSF在使用前添加），冰上放置。裂解緩沖液:①0.25mol/L蔗糖網織紅細胞標準緩沖液（RSB）②0.25mol/L蔗糖（超級純）③10mmol/Tris-HCl(pH7.4)④10mmol/LNaCl⑤3mmol/LMgCl2⑥1mmol/LDTT⑦0.5mmol/LPMSF(用前從溶于乙醇的100mmol/L貯存液中添加）濃蔗糖溶液:①2mol/L蔗糖RS...

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從哺乳動物細胞或組織分離DNA

材料與儀器：細胞、TBS抽提緩沖液、離心管實驗步驟：步驟1：根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟1進行操作。(1)細胞樣品①單層培養的細胞以用冰預冷的TBS將單層細胞洗滌2次，用刮棒把細胞刮入約0.5ml的TBS中，將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中，用1mlTBS沖洗培養皿，并入離心管中的細胞懸液。于4℃以1500g離心10分鐘以收獲細胞。用5~10倍體積經冰預冷的TBS重懸細胞并再度離心。用TE(pH8.0）重懸細胞，使細胞密度為5x107細胞/ml，轉移至一個三角燒瓶中...

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細胞凍存和復蘇實驗

實驗方法原理：細胞凍存和復蘇的基本原理是慢凍快解凍，已被證明能最大限度地提高細胞活力。目前常用甘油或二甲基亞砜作為細胞低溫保存的保護劑。這兩種物質可以提高細胞膜對水的滲透性，再加上緩慢的冷凍可以使細胞內的水從細胞中滲出，減少細胞內冰晶的形成，從而減少冰晶形成對細胞的損傷。復蘇細胞時應采用快速熔融的方法，以保證細胞外晶體在短時間內熔融，以避免因水緩慢熔融進入細胞形成細胞內重結晶而對細胞造成損傷。實驗材料：細胞試劑、試劑盒：D-Hanks液、小牛血清、培養液、青霉素、鏈霉素、胰蛋...

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標記細胞株要如何保存？

細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經傳代成功后即為細胞系，由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代，或傳代次數有限，可稱為有限細胞系，如可以連續培養，則稱為連續細胞系，培養50代以上并無限培養下去。所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。從培養代數來講，可培養到40-50代。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間...

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細胞培養基介紹

細胞培養基的概念01細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境，并提供細胞營養和促進細胞生長增殖的基礎物質。細胞培養基是細胞培養的基礎，它為動物細胞的健康快速成長提供營養物質。所以，只要用到細胞進行生物技術產品的生產制造，就勢必少不了細胞培養基。培養液或培養基，英文都是medium。當它是粉劑時，傾向性地稱為培養基，而將粉劑配成液體后，多稱為培養液。培養液中常需補加血清、抗生素等成分。細胞培養基的分類02培養基主要有：天然細胞培養基、合成細胞培養基和無血清細胞培養基等。天然...

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C57小鼠皮膚成纖維細胞原代培養的方法

實驗方法1.將實驗小鼠脫頸處死，75%乙醇浸泡5min，固定，備皮，取背部皮膚至于含雙抗的冷PBS緩沖液中。2.仔細剝離脂肪，血管等多余組織，PBS清洗，加胰酶消化1h。3.分離真表皮，去除表皮后，PBS清洗3次。4.將真皮部分于培養皿內剪碎，加入適量胰酶，轉移至15ml離心管內，37℃恒溫水浴消化1h。5.消化結束后，加入H-DMEM*培養基終止反應，1000rpm離心5min，棄上清。6.PBS清洗一遍，離心棄上清。7.將清洗后的組織塊均勻鋪于6cm培養皿內，加入2ml*...

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